做好一項(xiàng)實(shí)驗(yàn),好的實(shí)驗(yàn)設(shè)備是少不了的,尤其是現(xiàn)如今大部分實(shí)驗(yàn)室經(jīng)費(fèi)都還充足的情況下,以下是蛋白質(zhì)純化常用到的實(shí)驗(yàn)設(shè)備,僅供參考。
(1)、超聲波細(xì)胞破碎機(jī)
適用于5-100g濕菌體超聲破碎,實(shí)驗(yàn)室規(guī)模用。一般可選擇直徑10、15、20mm的超聲探頭。推薦國產(chǎn)機(jī)器為寧波新芝。
(2)、高壓勻漿機(jī)
大規(guī)模生產(chǎn)用,對菌體量無限制。破菌效果好,但要注意冷卻。
(3)、高分散乳化機(jī)
均勻懸浮菌體用,比攪拌快,均勻性好,特別適合于大規(guī)模生產(chǎn)。另外,大規(guī)模生產(chǎn)時(shí)緩沖液的配制很有用,可快速溶解、混勻。推薦品牌:IKA 國產(chǎn)品牌:FLUKO;
(4)、中空纖維超濾柱
大規(guī)模生產(chǎn)時(shí)做菌體收集用,要配合大蠕動(dòng)泵及壓力表。
(5)、高速冷凍離心機(jī)
小試、中試菌體收集用,破菌后離心,包涵體溶解后離心、小規(guī)模離心超濾等。推薦品牌:BECKMAN、日立、Eppendorf
(6)、磁力攪拌器
就是攪拌用了。緩沖液配制,包涵體溶解等。推薦品牌:國產(chǎn)的都行,最好配4或6工位的。
(7)、真空泵
離心上清過濾、緩沖液過濾、樣品過濾等。推薦品牌:Millipore WP61型。
(8)、過濾器
同真空泵配合使用。推薦品牌:Sartorius燒結(jié)金屬墊板的不銹鋼50mm濾器。
(9)、pH計(jì)
緩沖液配制、樣品pH調(diào)節(jié)用。推薦品牌:梅特勒
(10)、電導(dǎo)儀
就是測定緩沖液及樣品的電導(dǎo)了。
(11)、純水儀
如果沒有管道系統(tǒng)的純水設(shè)備,那就必需要的了。至少也是要去離子水、雙蒸水或三蒸水。推薦品牌:MINI Q
(12)紫外可見分光光度計(jì)
測定蛋白濃度。推薦品牌:Beckman,島津
(13)、核酸蛋白檢測儀
純化時(shí)在線監(jiān)測。如果不是用AKTA、Bio-Rad之類的高級儀器,就必須要了。
(14)、蠕動(dòng)泵
簡單純化系統(tǒng)用、包涵體稀釋復(fù)性。推薦品牌:蘭格、GE公司P50。
(15)、純化系統(tǒng)
高級的純化系統(tǒng)了。推薦品牌:AKTA explorer、AKTA Purifier。不推薦bio-rad的DUOFLOW。
(16)、膜超濾器
蛋白樣品濃縮、緩沖液置換、以及藥品級蛋白純化時(shí)緩沖液的去內(nèi)毒素用。推薦品牌:Millipore Labscale、Pellicon(泵可用國產(chǎn)的蘭格)
(17)、蛋白電泳儀
SDS-PAGE、Westblot用。推薦品牌:Bio-Rad。
(18)、脫色搖床
電泳染色、脫色用。
(19)、制冰機(jī)
破菌時(shí)冷卻用。
(20)、恒溫培養(yǎng)箱
融合蛋白酶切去除tag時(shí)恒溫用,做ELISA時(shí)用。
(21)、凝膠成像儀
就是給電泳膠及WB拍照片用,要配照片打印機(jī)哦。就是一臺(tái)數(shù)碼相機(jī),硬件各品牌沒有本質(zhì)差異,主要看那家的軟件做的好,界面友好。
(22)、電磁爐
加熱電泳樣品。
(23)、微波爐
電泳考染脫色。加熱水,溶解尿素、硫酸銨等。
(24)、微量取樣器
就是槍了。從1ul到5ml都要的。還有一種電動(dòng)的,可以用刻度吸管。推薦品牌:Gilson,eppendorf
(25)超凈工作臺(tái)
做蛋白樣品的無菌過濾用。
(26)、冰箱
不說了。
(27)、電風(fēng)扇
小量樣品的濃縮風(fēng)干。
(28)、電子天平
稱重了。兩種精度:0.1mg和0.01g。推薦品牌:梅特勒
(29)、空調(diào)
這個(gè)我相信大家都不會(huì)反對,也是蛋白純化對環(huán)境的要求。
(30)、超聲波清洗機(jī)
緩沖液脫氣用,當(dāng)然也可以采用真空泵抽真空的方法。特別是做疏水層析時(shí),有機(jī)溶劑與水相混溶時(shí)脫氣。
(31)、酶標(biāo)儀、洗板機(jī)
測定蛋白質(zhì)免疫活性用。特別當(dāng)我們純化的蛋白原料含量很低時(shí),SDS-PAGE無法有效監(jiān)測就必須應(yīng)用Elisa方法。
(32)、恒溫干燥箱、干烤箱
恒溫干燥箱用于玻璃器皿、一般塑料件洗滌后的干燥,設(shè)定溫度40-60度。
干烤箱用于干烤滅菌,內(nèi)毒素去除等,設(shè)定溫度180-220度。
(33)、酸缸
就是做細(xì)胞培養(yǎng)常用的那種浸泡容器的東東,對藥品級的蛋白純化要求容器都要用酸缸泡過。
(34)、UPS電源
保護(hù)層析設(shè)備,防止數(shù)據(jù)丟失。
(35)、層析冷柜 低溫冷室
4度雙門的那種大冷柜,可以把層析柱放進(jìn)去,對溫度敏感的蛋白純化需要。最好能控制濕度,以保護(hù)蛋白純化系統(tǒng)
冷室作用同上,更徹底,只是運(yùn)行費(fèi)用更大。
(36)、冷凍干燥機(jī)(器)、
蛋白質(zhì)保存較佳的方案。從手提式到藥廠的大規(guī)模凍干室形式多樣。