分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室需要的儀器配置
(1)培養(yǎng)箱 在分子生物學(xué)試驗(yàn)中,有很多反應(yīng)都是在特定溫度下進(jìn)行的,這時(shí)就需要一個(gè)控溫的裝置。例如:用于細(xì)菌的平板培養(yǎng),我們通常設(shè)定為37℃于培養(yǎng)箱倒置培養(yǎng);其他分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)如酶切等需要25℃,30℃,37℃等條件。
(2)冰箱 冰箱是實(shí)驗(yàn)室保存試劑和樣品必不可少的儀器。分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中用到的試劑有些要求是4度保存,有些要求是負(fù)20度保存,實(shí)驗(yàn)人員一定要看清試劑的保存條件,放置在恰當(dāng)?shù)臏囟认卤4?。具體來說,不同溫度下保存的物品如下:
a. 4℃適合儲(chǔ)存某些溶液、試劑、藥品等。
b.-20℃適用于某些試劑、藥品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白質(zhì)樣品等。
c.-80℃適合某些長期低溫保存的樣品、大腸桿菌菌種、純化的樣品、特殊的低溫處理消化液,感受態(tài)等的保存。
d.0-10℃的層析冷柜適合低溫條件下的電泳、層析、透析等實(shí)驗(yàn)。
(3)搖床 搖床是實(shí)驗(yàn)室常用儀器,一般有常溫型和低溫型兩種。對(duì)于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室,如果能配置低溫型搖床,就可以適應(yīng)不同的實(shí)驗(yàn)需求。例如:用于大腸桿菌,酵母菌等生物工程菌種的振蕩培養(yǎng)及蛋白的誘導(dǎo)表達(dá),培養(yǎng)通常為28度和37度,誘導(dǎo)表達(dá)需要20-37度;在感受態(tài)的制備過程中,需要有18度的溫度控制;用于蛋白凝膠的染色脫色時(shí)振蕩,常溫使用;用于大腸桿菌常規(guī)轉(zhuǎn)化時(shí)振蕩復(fù)蘇,常為37度。對(duì)于控制溫度低于室溫時(shí),我們需要低溫型搖床來控溫。
(4)水浴鍋 水浴鍋也是一種控溫裝置,水浴控溫對(duì)于樣品來說比較快速且接觸充分。例如,用于42度的大腸桿菌轉(zhuǎn)化時(shí)的熱激反應(yīng);用于DNA雜交過程中水浴控溫。
(5)烘箱 烘箱是用于滅菌和洗滌后的物品烘干。烘箱有不同的控溫范圍,用戶可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行選擇。例如,有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中進(jìn)行烘干;用于RNA方面的實(shí)驗(yàn)用具,需要在250℃烤箱中烘干。
(6)純水裝置 純水裝置包括蒸餾水器和純水機(jī)。蒸餾水器的價(jià)格便宜,但在造水過程中需要有人值守;純水機(jī)價(jià)格高些,但是使用方便,可以儲(chǔ)存一定量的純水。純水使用也有不同的級(jí)別,一般實(shí)驗(yàn)用水需要純水,用于PCR、DNA測(cè)序、酶反應(yīng)均需要超純水。
(7)滅菌鍋 分子生物學(xué)所用到的大部分實(shí)驗(yàn)用具都應(yīng)嚴(yán)格消毒滅菌。包括實(shí)驗(yàn)物品、試劑、培養(yǎng)基等。滅菌鍋也有不同大小型號(hào),有些是手動(dòng)的,有些是全自動(dòng)的。用戶需要根據(jù)自己的需要選購。
(8)天平 天平用于精確稱量各類試劑。實(shí)驗(yàn)室常用的是電子天平,電子天平按照精度不同有不同的級(jí)別。
(9)液體量器 液體量器用于精密量取各類液體。常見的液體量器有量筒、移液管、微量取液器、刻度試管、燒杯。
(10)pH計(jì) 用于配置試劑時(shí)精確測(cè)量PH值,從而保證配置的溶液的精確性。有時(shí)也需要利用pH計(jì)測(cè)定樣品溶液的酸堿度。
(11)分光光度計(jì) 分光光度計(jì)通過測(cè)定吸光值,從而用于分析樣品核酸和蛋白的含量及純度;同時(shí)也可以測(cè)定培養(yǎng)菌液的濃度。
(12)離心機(jī) 離心機(jī)有冷凍和常溫之分。主要用于收集微生物菌體、細(xì)胞碎片以及其他沉淀物。有些樣品由于在常溫下不太穩(wěn)定,需要低溫環(huán)境。例如在感受態(tài)制備過程中必須保證低溫環(huán)境,所以需要冷凍離心機(jī)。
(13)超凈工作臺(tái) 分子生物學(xué)中凡是涉及對(duì)細(xì)菌的操作均需在超凈工作臺(tái)下完成,還有感受態(tài)制備,轉(zhuǎn)化反應(yīng)等,都需要無菌的環(huán)境。
(14)電泳系統(tǒng) 實(shí)驗(yàn)室常用的電泳主要是三種:水平電泳用于核酸DNA/RNA的瓊脂糖電泳檢測(cè);垂直電泳用于蛋白的聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測(cè);轉(zhuǎn)印電泳用于將蛋白轉(zhuǎn)印到膜上做western檢測(cè)。
(15)PCR儀 PCR儀有不同的類型,分別用于不同的實(shí)驗(yàn)。普通和梯度PCR儀用于基因克隆和基因檢測(cè)過程中DNA/RNA的擴(kuò)增。熒光定量PCR儀用于核酸定量分析、基因表達(dá)差異分析、單核苷酸多態(tài)性檢測(cè)、甲基化檢測(cè)。原位PCR儀用于鑒定和定位帶有靶序列的細(xì)胞在組織中的位置。
(16)凝膠成像分析系統(tǒng)/紫外檢測(cè)儀 凝膠成像系統(tǒng)用于對(duì)染色后的核酸瓊脂糖電泳膠和蛋白聚丙烯酰胺凝膠的觀察和拍照,有些可以進(jìn)行切膠操作。紫外檢測(cè)儀可以用于對(duì)染色后的核酸瓊脂糖電泳膠的觀察,膠回收時(shí)切膠操作,但是不能連接電腦拍照。
(17)制冰機(jī) 實(shí)驗(yàn)室常用的是雪花制冰機(jī),制冰機(jī)一般是按每日制冰量分成不同型號(hào)。分子實(shí)驗(yàn)室中制造大多數(shù)核酸、蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn)操作所需的低溫環(huán)境,以減少核酸酶或蛋白質(zhì)酶的水解。感受態(tài)制備也需要長時(shí)間冰浴。
(18)磁力攪拌器 在配置試劑過程中,有些試劑較難溶解,這時(shí)需要借助磁力攪拌器。磁力攪拌器可以加速溶解固體內(nèi)容物。磁力攪拌器一般帶加熱功能。
(19)生物安全柜 分子實(shí)驗(yàn)中涉及的試劑和樣品很多是有毒的,對(duì)于操作人員來說傷害較大。為了防止有害懸浮微粒、氣溶膠的擴(kuò)散,可以利用生物安全柜對(duì)操作人員、樣品及樣品間交叉感染和環(huán)境提供安全保護(hù)。
(20)微波爐和電爐 用于溶液的快速加熱,電泳瓊脂糖凝膠的加熱溶化配制,固體培養(yǎng)基的加熱溶化。
(21)液氮罐 分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中感受態(tài)細(xì)胞的制備需要液氮處理。感受態(tài)的保存也可以存于液氮中。
(22)微管移液器 微管移液器也有不同型號(hào),是用于準(zhǔn)確量取特定體積的溶液。