做好一項實驗,好的實驗設備是少不了的,尤其是現如今大部分實驗室經費都還充足的情況下,以下是蛋白質純化常用到的實驗設備,僅供參考。
(1)、超聲波細胞破碎機
適用于5-100g濕菌體超聲破碎,實驗室規(guī)模用。一般可選擇直徑10、15、20mm的超聲探頭。推薦國產機器為寧波新芝。
(2)、高壓勻漿機
大規(guī)模生產用,對菌體量無限制。破菌效果好,但要注意冷卻。
(3)、高分散乳化機
均勻懸浮菌體用,比攪拌快,均勻性好,特別適合于大規(guī)模生產。另外,大規(guī)模生產時緩沖液的配制很有用,可快速溶解、混勻。推薦品牌:IKA 國產品牌:FLUKO;
(4)、中空纖維超濾柱
大規(guī)模生產時做菌體收集用,要配合大蠕動泵及壓力表。
(5)、高速冷凍離心機
小試、中試菌體收集用,破菌后離心,包涵體溶解后離心、小規(guī)模離心超濾等。推薦品牌:BECKMAN、日立、Eppendorf
(6)、磁力攪拌器
就是攪拌用了。緩沖液配制,包涵體溶解等。推薦品牌:國產的都行,最好配4或6工位的。
(7)、真空泵
離心上清過濾、緩沖液過濾、樣品過濾等。推薦品牌:Millipore WP61型。
(8)、過濾器
同真空泵配合使用。推薦品牌:Sartorius燒結金屬墊板的不銹鋼50mm濾器。
(9)、pH計
緩沖液配制、樣品pH調節(jié)用。推薦品牌:梅特勒
(10)、電導儀
就是測定緩沖液及樣品的電導了。
(11)、純水儀
如果沒有管道系統的純水設備,那就必需要的了。至少也是要去離子水、雙蒸水或三蒸水。推薦品牌:MINI Q
(12)紫外可見分光光度計
測定蛋白濃度。推薦品牌:Beckman,島津
(13)、核酸蛋白檢測儀
純化時在線監(jiān)測。如果不是用AKTA、Bio-Rad之類的高級儀器,就必須要了。
(14)、蠕動泵
簡單純化系統用、包涵體稀釋復性。推薦品牌:蘭格、GE公司P50。
(15)、純化系統
高級的純化系統了。推薦品牌:AKTA explorer、AKTA Purifier。不推薦bio-rad的DUOFLOW。
(16)、膜超濾器
蛋白樣品濃縮、緩沖液置換、以及藥品級蛋白純化時緩沖液的去內毒素用。推薦品牌:Millipore Labscale、Pellicon(泵可用國產的蘭格)
(17)、蛋白電泳儀
SDS-PAGE、Westblot用。推薦品牌:Bio-Rad。
(18)、脫色搖床
電泳染色、脫色用。
(19)、制冰機
破菌時冷卻用。
(20)、恒溫培養(yǎng)箱
融合蛋白酶切去除tag時恒溫用,做ELISA時用。
(21)、凝膠成像儀
就是給電泳膠及WB拍照片用,要配照片打印機哦。就是一臺數碼相機,硬件各品牌沒有本質差異,主要看那家的軟件做的好,界面友好。
(22)、電磁爐
加熱電泳樣品。
(23)、微波爐
電泳考染脫色。加熱水,溶解尿素、硫酸銨等。
(24)、微量取樣器
就是槍了。從1ul到5ml都要的。還有一種電動的,可以用刻度吸管。推薦品牌:Gilson,eppendorf
(25)超凈工作臺
做蛋白樣品的無菌過濾用。
(26)、冰箱
不說了。
(27)、電風扇
小量樣品的濃縮風干。
(28)、電子天平
稱重了。兩種精度:0.1mg和0.01g。推薦品牌:梅特勒
(29)、空調
這個我相信大家都不會反對,也是蛋白純化對環(huán)境的要求。
(30)、超聲波清洗機
緩沖液脫氣用,當然也可以采用真空泵抽真空的方法。特別是做疏水層析時,有機溶劑與水相混溶時脫氣。
(31)、酶標儀、洗板機
測定蛋白質免疫活性用。特別當我們純化的蛋白原料含量很低時,SDS-PAGE無法有效監(jiān)測就必須應用Elisa方法。
(32)、恒溫干燥箱、干烤箱
恒溫干燥箱用于玻璃器皿、一般塑料件洗滌后的干燥,設定溫度40-60度。
干烤箱用于干烤滅菌,內毒素去除等,設定溫度180-220度。
(33)、酸缸
就是做細胞培養(yǎng)常用的那種浸泡容器的東東,對藥品級的蛋白純化要求容器都要用酸缸泡過。
(34)、UPS電源
保護層析設備,防止數據丟失。
(35)、層析冷柜 低溫冷室
4度雙門的那種大冷柜,可以把層析柱放進去,對溫度敏感的蛋白純化需要。最好能控制濕度,以保護蛋白純化系統
冷室作用同上,更徹底,只是運行費用更大。
(36)、冷凍干燥機(器)、
蛋白質保存較佳的方案。從手提式到藥廠的大規(guī)模凍干室形式多樣。